Priatelia, ktorí robia experimenty súvisiace s bunkami, musia často používať metódy zmrazenia buniek. Stručne povedané, zmrazené skladovanie buniek má zachrániť bunky v prostredí s nízkou teplotou, aby sa dosiahol účel dlhodobej konzervácie. Bunky budú mať počas procesu prenosu určitý stupeň mutácie. Aby sa zabezpečilo, že bunky môžu byť stále použité v prípade bunkového znečistenia a mutácie, niektoré bunky sa zvyčajne používajú na zmrazenie.
Princíp zmrazenia buniek
Jedným princípom procesu zmrazenia a obnovy buniek je „pomalá zmrazená fúzia“, aby sa maximálne zachovala vitalita buniek. Jednoducho povedané, pri mrazení a chladení musí byť pomalý a po zotavení z nízkej teploty sa musí rýchlo zahriať. Dôvodom pomalého zmrazovania je, že ak sú bunky umiestnené priamo v prostredí s ultranízkou teplotou, ako je tekutý dusík, bunky vytvoria veľké ľadové kryštály, ktoré bunky poškodia.
Ak ho zmrazíte pomaly, bunky sa môžu pomaly dehydratovať, aby sa dosiahol účel ochrany buniek. Okrem toho sa pri obnove má tiež zabrániť tomu, aby malé kryštály ľadu tvorili veľké kryštály ľadu, teda ťažké kryštály ľadových kryštálov. Preto, keď každý zvyčajne robí zmrazenie buniek, vždy to spôsobí, že bunky utrpia straty, čo bude mať pravdepodobne vplyv na krok zmrazenia.
Niekoľko spôsobov zmrazenia buniek
Manuálna metóda: Zmrazené bunky sa zvyčajne skladujú v tekutom dusíku. Manuálna prevádzková metóda spočíva v chladení gradientu v chladničke. Bunky uložte do mrazenej skladovacej skúmavky a vložte ich do chladničky s teplotou 4 °C, -20 °C, -80 °C v poradí. Pred premiestnením do tekutého dusíka zmrazené na 24 hodín pri -80 stupňoch C. Manuálne chladenie nevyžaduje dodatočné doplnenie ďalšieho spotrebného materiálu. Dá sa ovládať ručne. Je to najjednoduchšie, ale nie je to jednoduché. Skutočná prevádzka je problematická. A efekt nie je príliš dobrý, pretože tento spôsob chladenia stále nie je jednotný a nie je nutne použiteľný pre krehkejšie bunky.
Gradientový chladiaci box: Gradientový chladiaci box predávaný na trhu sa špeciálne používa na rovnomerné chladenie procesu mrazenia. Rýchlosť chladenia je zvyčajne -1 stupňov za minútu. Vložte mraziacu skladovaciu trubicu do gradientového chladiaceho boxu a gradientový chladiaci box umiestnite priamo do prostredia chladničky s teplotou -80 °C, aby ste strávili noc bez manuálnej gradientovej prevádzky. Potom sklopte depozitnú trubicu a vložte ju do tekutého dusíka. Efekt použitia gradientových chladiacich boxov je lepší, pretože komerčné chladiace boxy na trhu dokážu zabezpečiť zhruba rovnomernú rýchlosť chladenia.
Na trhu sú dva bežné gradientné chladiace boxy. Potreba pridať izopropyl, zvyčajne telo krabice PC. Pri použití pridanie izopenolu do odmerky v krabici pri jeho použití. Izopropanol sa používa ako nosič na akumuláciu a rozvod tepla.
Iný druh nie je potrebné pridávať s izopropylom, penením a mrazničku je možné umiestniť priamo počas používania, čo je pohodlnejšie na obsluhu.
Chladiaci box izopropanolu sa odporúča vymeniť po niekoľkonásobnom použití, ale pretože izopropanol je škodlivá kvapalina, ktorá poškodzuje experimenty a životné prostredie, zvyčajne sa môže použiť viackrát. Je však potrebné zabezpečiť, aby kvapalina bola v určitom množstve.
Neprogramované mrazené skladovanie: Používajte neprogramované mrazené tekutiny, ktoré je možné zakúpiť na trhu. V porovnaní s tradičnou mrazenou kvapalinou môže vnútorný komponent znížiť poškodenie buniek ľadového kryštálu, takže nie je potrebné používať gradient na ochladzovanie, ani nie je potrebný gradientový chladiaci box. Mrazený sklad je možné umiestniť priamo do prostredia chladničky s teplotou -80 °C.
Mnohé vzorky buniek sú veľmi vzácne. Okrem nás ho musíme použiť aj pri pokusoch. Pri výbere súvisiacich produktov si tiež musíte čo najviac vybrať dobré produkty. Vyberte mrazenú skladovaciu trubicu s kvalifikovanou kvalitou, skúste použiť gradientný chladiaci nástroj na zmrazenie a maximalizujte záruku nízkeho poškodenia buniek, aby ste predišli malým stratám v dôsledku malých.