Mikrobiálne znalosti, ktoré chcete
Mikroorganizmy sú skupinou drobných organizmov, ktoré sa v prírode bežne vyskytujú a sú voľným okom neviditeľné a musia byť zväčšené stokrát, tisíckrát alebo dokonca desaťtisíckrát pomocou optického mikroskopu alebo elektrónového mikroskopu. Majú výhody malej veľkosti, jednoduchej štruktúry, rýchlej reprodukcie, ľahkej variácie a silnej schopnosti prispôsobiť sa prostrediu.
Klasifikácia mikroorganizmov:
Existuje mnoho druhov mikroorganizmov, aspoň viac ako 100,000 druhov. Podľa ich štruktúry, chemického zloženia a životných návykov a iných rozdielov možno rozdeliť do troch kategórií.
Jadro eukaryotických mikrobiálnych buniek má vyšší stupeň diferenciácie, vrátane jadrovej membrány, jadierka a chromozómov; cytoplazma má kompletné organely (ako je endoplazmatické retikulum, ribozóm a mitochondrie atď.). K tomuto typu mikroorganizmov patria huby.
Prokaryotické mikrobiálne bunky majú nízky stupeň jadrovej diferenciácie, iba primitívnu nukleoplazmu, bez jadrovej membrány a jadierka; organely nie sú veľmi úplné. Existuje mnoho druhov takýchto mikroorganizmov, vrátane baktérií, spirochét, mykoplazmy, rickettsie, chlamýdií a aktinomycét.
Acelulárne mikroorganizmy nemajú žiadnu typickú bunkovú štruktúru a žiadny enzýmový systém na výrobu energie a môžu rásť a rozmnožovať sa iba v živých bunkách. K tomuto typu mikroorganizmov patria vírusy.
Separácia a čistenie mikroorganizmov
Mikrobiálna kultúra obsahujúca viac ako jeden druh sa nazýva zmiešaná kultúra. Ak všetky bunky v kolónii pochádzajú z jednej rodičovskej bunky, kolónia sa nazýva čistá kultúra. Pri identifikácii bakteriálnych druhov sa vo všeobecnosti vyžaduje, aby použité mikroorganizmy boli čisté kultúry. Proces získavania čistej kultúry sa nazýva separácia a čistenie a existuje veľa metód.
1. Metóda nalievania
Najprv sa mikrobiálna suspenzia zriedi v sérii a určité množstvo riedenia sa úplne zmieša s rozpusteným živným agarovým médiom udržiavaným na približne 40-50 stupňoch a potom sa zmes naleje do sterilnej Petriho misky. Po stuhnutí bola platňa inkubovaná hore nohami v konštantnej komore. Jedna bunka sa namnoží, aby sa vytvorila kolónia, z jednej kolónie sa vytvorí suspenzia a vyššie uvedené kroky sa niekoľkokrát opakujú, aby sa získala čistá kultúra.
2. Metóda poťahovania plochých dosiek
Najprv sa mikrobiálna suspenzia správne nariedi a určité množstvo riedenia sa nanesie na sterilnú platňu s živným agarom, ktorá stuhne, a potom sa riedenie rovnomerne nanesie na povrch média sterilnou sklenenou špachtľou. Jedna kolónia môže byť získaná inkubáciou pri konštantnej teplote.
3. Metóda ryhovania doštičiek
Najjednoduchší spôsob izolácie mikroorganizmov je pruhovanie. Naneste malé množstvo kultúry na platňu pomocou sterilnej slučky. Existuje mnoho spôsobov písanie. Bežné metódy ryhovania, pri ktorých je pravdepodobnejšie, že sa objavia ako jedna kolónia, sú metóda lomítka, metóda krivky, metóda štvorca, metóda žiarenia a metóda štyroch mriežok. Keď sa očkovacia slučka pohybuje na povrchu média dozadu, bakteriálna kvapalina na očkovacej slučke sa postupne zriedi a nakoniec sa na nakreslenej čiare rozptýli jedna bunka. Po kultivácii každá bunka vyrastie do kolónie.
4. Metóda kultivácie obohatenia
Metóda a princíp kultivačnej metódy obohatenia sú veľmi jednoduché. Môžeme vytvoriť podmienky, ktoré umožnia rast iba požadovaným mikróbom a za týchto podmienok môžu požadované mikróby efektívne konkurovať iným mikróbom a ďaleko prevyšovať ostatné mikróby, pokiaľ ide o schopnosť rastu. Ak sa majú izolovať nejaké obligátne parazity, vzorky sa musia naočkovať do zodpovedajúcich citlivých populácií hostiteľských buniek, aby rástli vo veľkom počte. Čisté parazitické baktérie je možné získať opakovaným výsevom.
5. Anaeróbna metóda
V laboratóriu sa na izoláciu niektorých anaeróbnych baktérií môže ako kultivačná nádoba použiť skúmavka s pôvodným médiom a skúmavka sa môže niekoľko minút zohrievať vo vriacom vodnom kúpeli, aby sa vypudil rozpustený kyslík z média. . Potom sa rýchlo ochladí a naočkuje. Po inokulácii sa na povrch média pridal sterilný parafín, aby sa médium izolovalo od vzduchu. Ďalšou metódou je nahradiť plyn v médiu N2 alebo CO2 po naočkovaní a potom uzavrieť ústie skúmavky nad plameňom. Niekedy, aby sa niektoré anaeróbne baktérie izolovali efektívnejšie, izolovaná vzorka sa môže naočkovať na médium a potom môže byť Petriho miska umiestnená do úplne utesneného zariadenia na anaeróbnu kultiváciu.
6. Metóda izolácie jednej bunky (alebo jednej spóry).
Je to metóda mikroseparácie na priamu izoláciu jednotlivých buniek alebo jednotlivých jedincov zo zmiešaných populácií na kultiváciu, aby sa získala čistá kultúra. V prípade väčších mikroorganizmov môže byť pomocou kapiláry extrahovaný jeden jedinec. Pre mikroorganizmy s relatívne malými jedincami je potrebný mikromanipulátor na zber jednotlivých mikrobiálnych buniek alebo spór pomocou kapiláry alebo mikroihly, háčika, slučky atď. pod mikroskopom, aby sa získala čistá kultúra. Jednobunková separačná metóda má pomerne vysoké požiadavky na technológiu prevádzky.
Mikrobiálna kultúra
1. Podľa toho, či je pri kultivácii potrebný kyslík, možno ho rozdeliť do dvoch kategórií: aeróbna kultúra a anaeróbna kultúra.
Aeróbna kultúra: známa aj ako „aeróbna kultúra“. To znamená, že keď sa tento mikroorganizmus kultivuje, potrebuje pridávať kyslík, inak nebude dobre rásť. V laboratóriu sa šikmé kultúry získavajú získavaním sterilného vzduchu zvonku cez vatové zátky. Väčšina tekutej kultúry v Erlenmeyerovej banke sa pretrepáva na trepačke, takže vonkajší vzduch môže nepretržite vstupovať do fľaše.
Anaeróbna kultúra: Tiež známa ako „anaeróbna kultúra“. Takéto mikroorganizmy nepotrebujú na účasť na kultivácii kyslík. V procese kultivácie anaeróbnych mikroorganizmov je najdôležitejším bodom odstránenie kyslíka z média.
2. Podľa fyzikálneho stavu média ho možno rozdeliť do dvoch kategórií: tuhá kultúra a tekutá kultúra.
Pevná kultúra: Ide o metódu inokulácie kmeňov do sypkého a na živiny bohatého pevného média a kultiváciu mikroorganizmov za vhodných podmienok.
Kvapalná kultúra: V experimentoch môže tekutá kultúra spôsobiť rýchle množenie mikroorganizmov a získať veľké množstvo kultúr. Za určitých podmienok je to tiež účinná metóda pre mikroorganizmy na selekciu a obohatenie baktérií.
BKMAM biotech poskytuje zodpovedajúci laboratórny spotrebný materiál pre mikrobiálnu kultúru:
Jednorazové plastové okrúhle/štvorcové Petriho misky:
l Vysoko priehľadný polystyrénový materiál (PS);
lPovrch je hladký a plochý a pri pozorovaní mikroskopom nedochádza k žiadnemu optickému skresleniu buniek;
l Stohovací dizajn uľahčuje stohovanie a skladovanie;
l sterilizácia etylénoxidom (EO);
l Odolnosť proti opotrebovaniu a korózii.
Jednorazová plastová inokulačná tyčinka/slučka:
Polystyrénový materiál (PS);
Anti-znečistenie, endotoxín, DNáza, RNáza a pyrogény;
Nezávislé balenie bolo sterilizované;
Jemné spracovanie a kompletné špecifikácie;
Jednorazový plastový rozprašovač buniek, rozprašovač baktérií:
Polystyrénový materiál (PS);
Anti-znečistenie, endotoxín, DNáza, RNáza a pyrogény;
dizajn v tvare L, jednoduché použitie;
Jednorazové použitie, ľahké a pohodlné.
Nerezová oceľ / jednorazové sterilné doštičky so špecifikáciami:
Špecifikačná doska z nehrdzavejúcej ocele je vyrobená z nehrdzavejúcej ocele a jednorazová špecifikačná doska je vyrobená z potravinárskeho polypropylénu (PP).
Anti-znečistenie, endotoxín, DNáza, RNáza a pyrogény;
Oblasť rozmazania je prísne štandardizovaná
Jedna strana štítku so špecifikáciami je vybavená rukoväťou, ktorá sa ľahko ovláda
Sterilne zapečatené jedno balenie, aby sa zabránilo sekundárnej kontaminácii vzoriek a chybe vo výsledkoch
Jednorazové použitie, aby sa zabránilo krížovej kontaminácii a znížilo sa pracovné zaťaženie
Vitajte v spolupráci s nami
S pozdravom
Michael Peng
michael@bkmbio.com